产品概述
PrecisionNA dsDNA BR (Broad Range) Assay Kit 是一种简便、灵敏、精确的双链 DNA (dsDNA) 荧光定量检测试剂盒。本试剂盒包含荧光检测试剂、缓冲液及 dsDNA 标准品。该试剂盒对 dsDNA 样本在 4 - 2,000 ng 区间具有优秀的线性关系,可以对浓度为 0.2 - 2,000 ng/μl 的样本进行精确定量。该试剂盒对 dsDNA 的选择性高于 RNA,对一些常规的污染物,如盐、游离的核苷酸、蛋白质、溶剂、去污剂等都具有良好的耐受性。本产品操作简单,在室温下即可进行,使用前先将荧光检测试剂用缓冲液稀释成工作液,然后加入待测 dsDNA 样品,即可使用 Qubit 荧光仪进行检测。
产品组分
表格
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组分
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NA2602-01 (100 assays)
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NA2602-05 (500 assays)
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PrecisionNA dsDNA BR Reagent (200× in DMSO)
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250 μl
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1.25 ml
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PrecisionNA dsDNA BR Buffer
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50 ml
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250 ml
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PrecisionNA dsDNA BR Standard #1 (0 ng/μl in TE Buffer)
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1 ml
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5 ml
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PrecisionNA dsDNA BR Standard #2 (100 ng/μl in TE Buffer)
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1 ml
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5 × 1 ml
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保存条件
- 2 ~ 8℃避光保存,冰袋运输
- 推荐 PrecisionNA dsDNA BR Standard #2 于 -30 ~ -15℃ 长期存放
适用范围
0.2 - 2,000 ng/μl 的 dsDNA 样本
注意事项
- 荧光染料存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
- 标准品及样本在使用前请先颠倒混匀,避免吸取不均导致结果偏差。
- 为保证定量结果的精确,请使用校准后的移液器进行操作。
- 请在室温下进行定量检测。使用前,将试剂盒中的各组分平衡至室温。实验过程中,请勿长时间用手握住检测的 PCR 管,避免结果偏差。
- 请务必在样本加入后 3 h 内且避光条件下完成所有样本的检测,避免荧光淬灭导致结果偏差。
实验原理与流程概要
Fig 1. PrecisionNA dsDNA BR Assay Kit操作步骤:
- PrecisionNA Reagent、PrecisionNA Buffer按1:200稀释得到Working Solution。
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- PrecisionNA Standard #1、PrecisionNA Standard #2各取10μl,最终体积为200μl。
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- dsDNA Samples取1 - 20μl,加入1 - 20μl及180 - 199μl相关液体,最终体积为200μl。
实验流程
以下步骤适用于Qubit荧光仪:
- 使用前,将试剂盒中各组分平衡至室温。
- 取足够数量的0.5 ml PCR管用于样本和标准品的检测。
- 在每支PCR管盖上进行标注。请勿在PCR管侧壁上进行标注,以免影响荧光信号的采集。
- 配制检测工作液。取试剂中PrecisionNA dsDNA BR Reagent,用PrecisionNA dsDNA BR Buffer按照1:200的比例进行稀释,配制成检测工作液,现配现用。禁止用玻璃容器配制检测工作液。
- 应准备足量的检测工作液。例如有7个待检测的DNA样本,加上两个标准品,则需准备2ml的检测工作液,取10μl的PrecisionNA dsDNA BR Reagent加入到1,990μl的PrecisionNA dsDNA BR Buffer,涡旋混匀,备用。
- 配制检测标准品。取190μl检测工作液至标准品PCR管中,分别加入10μl Standard #1和Standard #2至相应的标准品PCR管中。
- 制备检测样品。取180 - 199μl检测工作液至检测PCR管中,分别加入1 - 20μl待测dsDNA样品,使得每个检测样品终体积为200μl。
- 若要添加1 - 2μl样品,请使用2μl移液器以获得最佳效果。
- 涡旋振荡2 - 3 sec,离心收集液体到管底部,尽量避免产生气泡。
- 将所有检测PCR管置于室温环境下避光孵育2 min。按照Qubit荧光仪的操作说明,选择dsDNA Broad Range程序测定浓度。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. |